PCR是聚(ju)合酶鏈(lian)式反應(Polymerase Chain Reaction)的(de)(de)簡稱,PCR是一種分子生物學技術,這個技術通過DNA基因(yin)追蹤系統,能(neng)迅速掌握患(huan)者體內的(de)(de)病(bing)毒含量,其(qi)精確(que)度高達納米級別。因(yin)此PCR實驗室(shi)凈化(hua)工(gong)程做的(de)(de)好,能(neng)夠精確(que)檢(jian)測(ce)病(bing)毒在(zai)患(huan)者體內存在(zai)的(de)(de)數量、是否(fou)復(fu)制、是否(fou)傳染、傳染性有(you)多強、是否(fou)必要服藥、肝功能(neng)有(you)否(fou)異常改變,這樣(yang)能(neng)及時判(pan)(pan)斷病(bing)人最適合使用哪類抗病(bing)毒藥物、判(pan)(pan)斷藥物療(liao)(liao)效(xiao)如何、給臨床治(zhi)療(liao)(liao)提供了(le)可靠的(de)(de)檢(jian)驗依據。
標準PCR實驗(yan)室凈化(hua)工程設(she)計規范應包(bao)括以下部分:
1、PCR實驗室的(de)布(bu)局
為了避免交叉感染,PCR擴增試驗室原則上分為4個獨立的工作區:主要包括試劑配置區、樣品處理區、核酸擴增區、產品分析區。并且必須嚴格按照單一方向進入每個工作區,即只從試劑儲存和制備區→樣品制備區→放大反應混合物制備和放大區→放大產物分析區進入。另外試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼萊蕪傳遞窗傳(chuan)遞,保證試劑和標本在傳(chuan)遞過(guo)程中不受污染(ran)。
2、標準三(san)區分離(li)及氣壓調節
PCR過程分為試(shi)劑制備(bei)、標本制備(bei)和PCR擴增檢(jian)測三個(ge)獨(du)立的(de)(de)實(shi)(shi)驗區(qu)(qu)(qu),由于各(ge)個(ge)實(shi)(shi)驗間集(ji)中布置,容易(yi)造成相(xiang)互干擾,因此,每(mei)個(ge)獨(du)立的(de)(de)實(shi)(shi)驗區(qu)(qu)(qu)都(dou)需要(yao)設置一個(ge)緩沖區(qu)(qu)(qu),且緩沖區(qu)(qu)(qu)需要(yao)采(cai)用獨(du)立的(de)(de)循環風系統并設置正壓(ya),使室(shi)內(nei)(nei)空氣不(bu)流(liu)(liu)(liu)向室(shi)外,室(shi)外空氣不(bu)流(liu)(liu)(liu)向室(shi)內(nei)(nei),以杜(du)絕室(shi)內(nei)(nei)外空氣交換。這樣就保證各(ge)個(ge)區(qu)(qu)(qu)域之(zhi)間具備(bei)單向的(de)(de)實(shi)(shi)驗工藝流(liu)(liu)(liu)、物(wu)流(liu)(liu)(liu)、人流(liu)(liu)(liu)與氣流(liu)(liu)(liu),形成單向流(liu)(liu)(liu)程的(de)(de)保護屏障,避(bi)免(mian)實(shi)(shi)驗之(zhi)間的(de)(de)相(xiang)互干擾,防止核(he)酸氣溶膠對實(shi)(shi)驗過程造成污(wu)染產生假性結果。
3、消毒:
在實(shi)驗區(qu)和(he)緩沖區(qu)頂(ding)部以及傳送窗內部安(an)裝有紫外燈,供消毒用。在實(shi)驗區(qu)的(de)實(shi)驗桌(zhuo)上方安(an)裝紫外線燈,對實(shi)驗桌(zhuo)進行局部消毒。
4、進入和(he)離(li)開實驗室(shi)路徑
進(jin)入(ru)實(shi)驗室(shi)區(qu)域的工作人員(yuan)應(ying)遵循以下路(lu)徑:公共潔凈(jing)區(qu)更衣室(shi)(更換潔凈(jing)服)緩沖室(shi)污染(ran)試驗區(qu)
員(yuan)工離開實驗室(shi)的路徑是:污染測試區緩沖室(shi)淋浴間(必要時可設置)-更衣室(shi)公共(gong)清(qing)潔(jie)區