PCR是(shi)(shi)聚合酶鏈式反應(ying)(Polymerase Chain Reaction)的(de)簡稱(cheng),PCR是(shi)(shi)一種(zhong)分(fen)子生(sheng)物(wu)(wu)學技術(shu),這個技術(shu)通(tong)過DNA基因追蹤系統(tong),能(neng)(neng)迅速掌握(wo)患者(zhe)體內的(de)病(bing)毒含量,其(qi)精確(que)度高達納米級別。因此PCR實驗室(shi)凈化工(gong)程做的(de)好(hao),能(neng)(neng)夠精確(que)檢(jian)測病(bing)毒在(zai)患者(zhe)體內存在(zai)的(de)數量、是(shi)(shi)否(fou)復(fu)制(zhi)、是(shi)(shi)否(fou)傳染(ran)、傳染(ran)性有多強、是(shi)(shi)否(fou)必(bi)要服藥、肝功能(neng)(neng)有否(fou)異常改變,這樣能(neng)(neng)及(ji)時判斷(duan)病(bing)人最適合使用(yong)哪類抗病(bing)毒藥物(wu)(wu)、判斷(duan)藥物(wu)(wu)療(liao)效如何、給臨床治療(liao)提供(gong)了(le)可靠的(de)檢(jian)驗依(yi)據。
標準(zhun)PCR實驗室凈(jing)化(hua)工(gong)程(cheng)設計規范(fan)應(ying)包括(kuo)以下部分:
1、PCR實驗室(shi)的布(bu)局
為了避免交叉感染,PCR擴增試驗室原則上分為4個獨立的工作區:主要包括試劑配置區、樣品處理區、核酸擴增區、產品分析區。并且必須嚴格按照單一方向進入每個工作區,即只從試劑儲存和制備區→樣品制備區→放大反應混合物制備和放大區→放大產物分析區進入。另外試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼東營傳遞窗傳遞(di),保證試劑和標本在傳遞(di)過程中不(bu)受污染。
2、標(biao)準三區分(fen)離及氣壓調(diao)節
PCR過程分為試(shi)劑制備、標本制備和PCR擴增檢(jian)測三個(ge)(ge)獨立(li)(li)的實(shi)驗區(qu),由于各個(ge)(ge)實(shi)驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,每個(ge)(ge)獨立(li)(li)的實(shi)驗區(qu)都需要(yao)(yao)設(she)置一個(ge)(ge)緩沖區(qu),且緩沖區(qu)需要(yao)(yao)采用獨立(li)(li)的循環風系統并設(she)置正(zheng)壓,使室(shi)(shi)內空(kong)氣(qi)(qi)(qi)不流(liu)(liu)(liu)(liu)向(xiang)室(shi)(shi)外(wai),室(shi)(shi)外(wai)空(kong)氣(qi)(qi)(qi)不流(liu)(liu)(liu)(liu)向(xiang)室(shi)(shi)內,以(yi)杜絕室(shi)(shi)內外(wai)空(kong)氣(qi)(qi)(qi)交(jiao)換。這樣就(jiu)保證(zheng)各個(ge)(ge)區(qu)域之(zhi)間具備單向(xiang)的實(shi)驗工藝流(liu)(liu)(liu)(liu)、物(wu)流(liu)(liu)(liu)(liu)、人流(liu)(liu)(liu)(liu)與(yu)氣(qi)(qi)(qi)流(liu)(liu)(liu)(liu),形成單向(xiang)流(liu)(liu)(liu)(liu)程的保護屏障,避免實(shi)驗之(zhi)間的相互干擾,防(fang)止(zhi)核酸氣(qi)(qi)(qi)溶膠對實(shi)驗過程造成污染產生(sheng)假性結果。
3、消毒:
在(zai)實驗(yan)區和(he)緩沖區頂部(bu)以(yi)及(ji)傳送窗內部(bu)安裝有紫外燈,供消毒(du)用。在(zai)實驗(yan)區的實驗(yan)桌上方安裝紫外線燈,對(dui)實驗(yan)桌進行局部(bu)消毒(du)。
4、進入和離開(kai)實驗室路徑
進(jin)入實驗室(shi)區域(yu)的工作人(ren)員(yuan)應遵循以下路徑(jing):公共潔凈(jing)區更(geng)衣室(shi)(更(geng)換潔凈(jing)服)緩(huan)沖(chong)室(shi)污染(ran)試(shi)驗區
員(yuan)工離開實驗室(shi)的路徑是:污染測試(shi)區緩沖(chong)室(shi)淋浴間(必(bi)要時可設置)-更衣室(shi)公共清潔區